期刊简介
《中华围产医学杂志》是由中国科学技术协会主管、中华医学会主办、北京大学第一医院承办的中华医学会系列杂志之一。围产医学是产科和新生儿科密切合作共同 研究的一个新的学科，以“优生优育、提高出生人口素质、保障母婴安全与健康”为宗旨，反映基础、临床与预防医学、遗传学和社会学等相关学科中有关围产医学 的新理论、新技术、新进展，旨在为我国广大围产医学工作者提供一个学术交流、信息传递和了解国内外围产医学发展动态的窗口与平台。
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首页>中华围产医学杂志
- 杂志名称：中华围产医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-9408
- 国内刊号：11-3903/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), CA 化学文摘(美)
化学合成小分子干扰RNA抑制缺氧大鼠视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α基因的表达
杨晓光；张文辉；黄晓艳；杨舒广；谢小强；叶贞志；白青青；周晓光
关键词：RNA, 小分子干扰, 缺氧诱导因子1, α亚基, 缺氧, 视网膜血管, 内皮细胞, 细胞增殖
摘要：目的 探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF- 1α)在早产儿视网膜病发病中的作用,为其基因治疗寻找新的靶点.方法 将化学合成的小分子干扰RNA( smallinterference RNA,siRNA)用脂质体介导法转染大鼠视网膜血管内皮细胞,转染的细胞在含化学缺氧剂——二氯化钴的培养基中培养.培养8h后,应用荧光定量逆转录-聚合酶链反应和Western印迹技术检测转染后细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达量.培养24 h后应用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法检测细胞的增殖活性.采用两独立样本t检验比较各转染组与阴性对照组之间的差异.结果 成功将siRNA转染至大鼠视网膜血管内皮细胞,荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术检测显示,针对靶基因HIF-1α设计的4条平行干扰序列siRNA均能不同程度抑制HIF-1α的转录表达,siRNA1、siRNA2和siRNA4组HIF-1α mRNA的相对表达水平分别为0.1620±0.0147、0.2034±0.0251和0.3049±0.0165,分别降至空白对照组(1.0000±0.0344)的16.20％、20.34％和30.49％,与阴性对照组(0.8334±0.0242)之间差异有统计学意义(t分别为16.786、8.953和4.087,P均＜0.05).Western印迹技术显示,siRNA1和siRNA2转染的大鼠视网膜血管内皮细胞HIF-1α蛋白表达水平分别为0.4956±0.0421和0.6544±1.0032,明显低于空白对照组(3.5105±0.4084)和阴性对照组(3.4019±1.0677),差异均有统计学意义(t分别为6.861、2.893、4.567和5.072,P均＜0.05).siRNA1和siRNA2组细胞增殖抑制率分别为(49.5±2.9)％和(67.4±1.2)％,明显高于阴性对照组[(15.7±1.5)％],差异有统计学意义(t分别为2.786和6.904,P＜0.05).结论 化学合成的HIF-1α siRNA能有效抑制大鼠视网膜血管内皮细胞在缺氧条件下HIF-1α mRNA及蛋白的表达,从而降低细胞增殖活性.
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